動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

6周齡雄性無(wú)特異性病原體C57BL/6小鼠來(lái)源于北京維特河實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司(北京，中國(guó))。動(dòng)物在標(biāo)準(zhǔn)條件下自由進(jìn)食和飲水，在12小時(shí)的明暗循環(huán)下飼養(yǎng)，8:00開(kāi)燈，記錄為ZT0(24)， 20:00關(guān)燈，記錄為ZT12。適應(yīng)1周后，將小鼠隨機(jī)分為兩組，每組36只，每籠n = 6只，分別為潔凈空氣對(duì)照組(Con)和O3組(O3)。

先前的研究表明，大鼠需要比人類(lèi)高4-5倍的O3濃度才能匹配人類(lèi)肺部的O3誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)(Hatch et al.， 1994,2013)。小鼠的呼吸頻率是大鼠的1.5-3倍。基于上述研究，結(jié)合8小時(shí)(0.075 ppm)中國(guó)國(guó)家環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)O3濃度，選擇0.5 ppm作為小鼠暴露的O3濃度。O3組小鼠暴露在0.5±0.05 ppm的O3環(huán)境中28天(4 h/天，ZT0-ZT4)，對(duì)照組小鼠暴露在類(lèi)似的室內(nèi)過(guò)濾空氣中。(臭氧發(fā)生器、實(shí)時(shí)臭氧監(jiān)測(cè)儀、臭氧尾氣處理裝置均購(gòu)自中國(guó)北京同林科技有限公司)。暴露于O3四周后，從ZT4開(kāi)始，在24小時(shí)內(nèi)每4小時(shí)采集一次血液和肝臟樣本。血清樣本保存在−80?C，供以后分析。肝臟邊緣制備組織病理切片，其余部分用預(yù)冷生理鹽水沖洗，然后快速冷凍于液氮中，保存于- 80?C。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均按照山西大學(xué)科學(xué)研究委員會(huì)批準(zhǔn)的指導(dǎo)方針進(jìn)行。

來(lái)自：Circadian rhythm disturbances involved in ozone-induced glucose metabolism disorder in mouse liver 

Yaru Zhang , Zhipeng Yan , Nan Nan , Guohua Qin *, Nan Sang 

College of Environment and Resource, Research Center of Environment and Health, Shanxi University, Taiyuan, Shanxi 030006, People’s Republic of China